广州市迈阔独思生物医药科技有限公司
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产品展示
ELISA黄曲霉毒素M1试剂盒
产地:广州市 白云区
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发布时间:2019/12/2
1.原则
该检测试剂盒基于间接竞争酶免疫法检测黄曲霉毒素M1。偶联抗原预先包被在微孔条上。样品中的黄曲霉毒素M1和预先包被在微孔条上的偶联抗原竞争抗黄曲霉毒素M1抗体。在添加酶缀合物之后,添加TMB底物用于着色。样品的光密度(OD)值与样品中的黄曲霉毒素M1呈负相关。将该值与标准曲线比较,随后获得黄曲霉毒素M1残留物。
 
2.技术规格
灵敏度:0.03 ppb
保温箱温度:25℃
保温时间:30min〜15min
检测限:
牛奶.................................... 0.1ppb
奶粉,酸奶………………………………………………0.3ppb
交叉反应率:
黄曲霉毒素M1…….100%
黄曲霉毒素B1…….12.9%
黄曲霉毒素B2…….1.4%
黄曲霉毒素G1….1.9%
黄曲霉毒素G2…….0.3%
恢复率:
牛奶……………………………………………………………….. 90±25%
奶粉,酸奶…………………………………………………………100±30%
 
3.组成
1条微孔板条12条带条,每条板条有8个可移动孔
2 6×标准溶液(各1 mL)0ppb 0.03ppb
0.09ppb 0.27ppb
0.81ppb 2.43ppb
3酶结合物7毫升红色帽子
4抗体工作液7ml蓝盖
5底材7毫升白色盖子
6底物B 7毫升黑盖
7 Stop Solution 7ml黄色盖子
8 20×浓缩洗涤缓冲液40ml白色盖子
9 10×浓缩再溶解溶液50ml透明盖
 
4.所需材料但未提供
1)设备:ELISA读取器(450 nm / 630nm),匀浆器,振荡器,离心机,天平:灵敏的0.01g,氮气干燥设备,培养箱,移液管,打印机
2)微量移液器:单通道20µl〜200µl,100µl〜1000µl,多通道30〜300μl
 
5.样品预处理
1)实验中只能使用一次性吸头,并且在吸收不同试剂时必须更换吸头;
2)在进行实验之前,必须清洁每个说明(预处理前必须注意以下几点)
实验用具,并在必要时进行重新清洁,以避免污染干扰实验结果。
样品预处理之前的溶液制备:
1)样品再溶解溶液
使用1份10x浓缩的再溶解溶液,并用9份去离子水溶解,以获得可立即使用的样品再溶解溶液。
样品制备
5.1原料奶和成品奶样品的制备
1)取出原奶和成品奶样品,置于室温下,待样品回到室温后直接进行测试。
2)取50μl进行测试
稀释倍数:1
5.2奶粉样品的制备
1)将1.0±0.05g奶粉样品放入50ml离心管中;加入10ml样品溶解溶液,充分摇动3min,在20℃以4000r / min以上的速度离心10min。
2)取50µl上清液进行测试。
稀释系数:10
5.3酸奶样品的制备
1)取1ml酸奶样品,以1:9的样品再溶解溶液稀释(100ul酸奶+ 900ul样品再溶解溶液),混合30s;
2)取50μl进行测试
稀释系数:10
 
6. ELISA程序
6.1说明
1.使用前将ELISA试剂置于室温(20-25°C)。
2.使用后立即将ELISA试剂放回2-8℃
3.分析过程中ELISA的再现性在很大程度上取决于洗涤板的一致性,正确的洗涤板操作是ELISA程序确定的关键
4.在恒温培养的所有过程中,避免光照,用盖膜密封微孔板
6. 2操作步骤
1.将试剂盒在室温(20-25℃)下放置至少30分钟,注意每种试剂在使用前均应摇匀;
2.将所需的微孔板条放入板架中。重新密封未使用的微孔板,在2-8℃下保存,不要冷冻。
(50 µL /孔)。然后是抗体工作溶液,每孔50 µL。通过手动摇动板轻轻混合,用盖膜密封微孔板,在黑暗中于25°C孵育30分钟。
6.清洗微孔板:小心打开盖膜,将液体倒出微孔;加入每孔250 µL的洗涤缓冲液,充分洗涤4-5次,每次15-30 s,然后取出并用吸水纸拍干。(干燥后用未用过的矛头刺破气泡)
7.显色:添加50 µL底物A溶液,然后添加50 µL3.溶液制备:取40毫升20倍浓缩洗涤缓冲液,以1:19的去离子水溶解(1份20倍浓缩洗涤缓冲液+ 19份去离子水),或根据需要进行配制。
4.编号:根据样品和标准溶液对微孔编号;每个样品和标准溶液应重复两次;记录他们的位置。
5.添加标准品/样品:将50 µL样品或标准溶液添加到单独的重复孔中,然后添加酶结合物 B